خالص سازی و تعیین ویژگی های بیوشیمیایی آنزیم گلوتاتیون اس- ترنسفراز از پسیل معمولی پسته (Agonoscena pistaciae Burckhardt and Lauterer (Hemiptera: Psyllidae

Authors

  • رضا حسن ساجدی گروه بیوشیمی، دانشکده علوم زیستی، دانشگاه تربیت مدرس، تهران، ایران
  • سیما زندوکیلی گروه گیاه پزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
  • علی علیزاده گروه گیاهپزشکی، دانشکده کشاورزی، دانشگاه ولی عصر رفسنجان
  • محمد قدمیاری گروه گیاه پزشکی، دانشکده علوم کشاورزی، دانشگاه گیلان، رشت، ایران
  • نرگس معماری زاده بخش تحقیقات آفت کش ها، موسسه تحقیقات گیاهپزشکی کشور، سازمان تحقیقات، آموزش و ترویج کشاورزی، تهران، ایران
Abstract:

آنزیم گلوتاتیون اس- ترنسفراز (GST) از حشرات بالغ پسیل پسته، Agonoscena pistaciae Burckhardt and Lauterer به واسطه رسوب گذاری سولفات آمونیوم و کروماتوگرافی میل ترکیبی با بکارگیری ستون Glutathione Sepharose 4B جداسازی و خالص شد. آنزیم خالص شده بصورت تک باند درSDS-PAGE  ظاهر شد و وزن مولکولی آنزیم 4/28 کیلو دالتون تخمین زده شد. آنزیم از پسیل پسته به صورت 27/39 برابر و با درصد بازیابی  37/12 خالص سازی شد و آنزیم خالص شده، فعالیت ویژه 08/30 U mg-1 protein نشان داد. دما و pH بهینه فعالیت آنزیم به ترتیب 30 درجه سلسیوس و 9 به دست آمد. مقادیر Km  و Kcat برای سوبسترای  GSH (Glutathione) به ترتیب 44/0 mM و 9/152 s−1 محاسبه شد و برای سوبسترای CDNB (1-chloro-2,4-dinitrobenzene) 33/0 mM و 7/207 s−1 به دست آمد. فعالیت آنزیم GST به طور کامل  با اضافه کردن EDTA، ZnCl2  و SDSمتوقف شد، این در حالی است که CaCl2، BaCl2، CoCl2، Hg2Cl2، MgCl2،Urea، MnCl2 وKCl  به طور جزئی فعالیت آنزیم را متوقف کرد. مطالعات بازدارندگی in vitro نشان داد که تمام آفت­ کش ­های شیمیایی (از جمله: ایمیداکلوپرید، استامی پراید، فوزالون و آمیتراز) بر فعالیت آنزیم خالص شده GST اثر بازدارندگی دارند. نتایج مطالعه ما با گسترش اطلاعات بیوشیمیایی آنزیم GST حاصل از پسیل معمولی پسته، به درک مکانیسم های مقاومت در این آفت کلیدی کمک می کند.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

تاثیر حشره‌کش‌های فلوپیرادیفورون، اسپیروتترامات و تیاکلوپرید روی پسیل معمولی پسته Agonoscena pistaciae Burckhardt & Lauterer (Hem.: Psyllidae)

پسیل پسته، Agonoscena pistaciae، یکی از آفات مهم باغ ­های پسته در ایران می ­باشد و باعت کاهش کیفیت و کمیت این محصول می­ شود. در این تحقیق، تاثیر غلظت ­های 5/0، 75/0 و 1 در هزار حشره­ کش فلوپیرادیفورون، 5/0 در هزار اسپیروتترامات و تیاکلوپرید و فلوپیرادیفورون 5/0 در هزار به­ همراه آبیاری روی پوره و حشره بالغ پسیل پسته در منطقه نیریز استان فارس بررسی شد. تعداد پوره و حشره کامل پسیل، از یک روز قبل ...

full text

نقش مهارکنندۀ پای‌پرونیل بوتوکساید در میزان فعالیت ویژۀ آنزیم گلوتاتیون اس‌ترانسفراز پسیل معمولی پسته، Agonoscena pistaciae

گلوتاتیون اس‌ترانسفرازها نقش بسیار مهمی در غیرسمی کردن ترکیبات آفت‌کش و مقاومت حشرات در برابر حشره‌کش‌ها ایفا می‌کنند. در این پژوهش تفاوت فعالیت آنزیم‌های گلوتاتیون اس‌ترانسفراز در دو فرم تابستانه و زمستانه پسیل بررسی شده است و اثر غلظت‌های‌ مختلف پی‌پرونیل بوتوکساید (PBO) (5/0، 1، 2، 4 و 8 میلی‌گرم بر لیتر) روی حشرات کامل پسیل پسته در میزان مهار فعالیت این آنزیم با استفاده از سوبسترای 1، کلرو ...

full text

خالص سازی و بررسی ویژگی های بیوشیمیایی گلوتاتیون اس- ترانسفراز در پسیل پسته (agonoscena pistaciae ) حساس و مقاوم به فوزالون

گلوتاتیون اس- ترانسفراز ها(gsts, ec 2.5.1.18) نقش مهمی را در سم زدایی فاز دوم ترکیبات خارجی (دارو ها، حشره کش ها و علف کش ها) و ترکیبات درونی اکثر موجودات زنده بازی می کنند. در این مطالعه آنزیم gst از دو جمعیت پسیل پسته حساس و مقاوم به فوزالون با استفاده از ستون کروماتوگرافی میل ترکیبی سفارز b4 خالص سازی شد و خصوصیات بیو شیمیایی آنزیم خالص شده با استفاده از سوبسترا های مصنوعی مثل 1-کلرو 2 و 4- ...

15 صفحه اول

حساسیت پسیل معمولی پسته (Agonoscena pistaciae Burkhardt and Lauterer) نسبت به عصاره چند گیاه در آزمایشگاه

پسیل معمولی پسته با نام علمیAgonoscena pistaciae Burkhardt and Lauterer (Hem.: Aphalaridae)، به‌عنوان یکی از مهمترین آفات باغ‌های پسته ایران شناخته شده‌است. روش‌های مختلفی مثل استفاده از آفت‌کش‌ها برای کنترل این آفت استفاده شده‌است، اما به دلیل خطرات زیست محیطی و محافظت از منابع طبیعی به‌خصوص در مدیریت سیستم‌های آب و خاک و استفاده از زنجیره غذایی استفاده از روش‌های دیگر ضروریست. در سال‌های اخیر...

full text

سمیت و تاثیر بیوشیمیایی چند آفت‌کش روی پسیل معمولی پسته، (Agonoscena pistaciae (Hem.: Psyllidae در شرایط مزرعه ای

پسیل معمولی پسته Agonoscena pistaciae Burckhardt and Lauterer یکی از مهم­ترین آفات پسته است که پوره‌ها و حشرات کامل آن از شیره گیاهی تغذیه می‌کنند. در این پژوهش اثر سه غلظت از آفت‌کش‌های اسپیرودیکلوفن، اسپینوساد، آزادیراختین و محلول سم‌پاشی تیمول که شامل غلظت­ های توصیه شده و دو غلظت، یکی نصف و دیگری دو برابر این غلظت بود، روی پوره‌های پسیل پسته بررسی شد. تاثیر این آفت‌کش‌ها بر میزان فعالیت آنز...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


Journal title

volume 38  issue 4

pages  409- 421

publication date 2019-03-16

By following a journal you will be notified via email when a new issue of this journal is published.

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023